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最近在某书上，总刷到实验员们关于厌氧菌培养的“血泪帖"：要么是培养罐漏气了，一周的实验白费；要么是手套箱成本太高，被老板念叨；养的菌状态时好时坏，数据总不稳定……
别急！这篇超详细的厌氧培养技术大盘点，就是来为你排忧解难的。我们将抛开厂商滤镜，公正剖析从经典到前沿的几种主流方法，帮你搞清楚它们的优缺点，找到适合你课题的那一条“捷径"。
（1）传统培养技术大盘点
厌氧菌的培养方法有许多：
物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空气置换法、气体喷射法或转管法等；
化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险粉法等；
生物学方法包括与需氧菌共生好氧法等；
混合法包括厌氧罐（袋）法、厌氧手套箱法或厌氧室法、空气置换铁丝绒法、空气置换钯粒法等。
以下，我们将对几个常用方法展开详细介绍。
一、Gas-pak法
Gas-pak法的核心原理是通过化学反应消耗密闭容器中的氧气，并生成二氧化碳，从而营造适合厌氧菌生长的无氧环境，是“专用厌氧罐 + 配套产气袋 + 内置催化剂"的标准化成套方案 。
优点：
1. 操作相对简便，无需复杂设备，将准备好的材料放入厌氧罐即可；
2. 适合中小规模实验需求。
缺点：
1. Gas-pak法的气体发生袋是一次性的，使用后就需要更换，长期使用下来成本较高；
2. 触媒在使用一定次数后催化效果会下降，也需要定期更换；
3. 在操作过程中若有疏忽（比如气体发生袋剪开后未及时放入厌氧罐、加水后没有迅速紧闭罐盖等），都可能导致厌氧环境营造失败。
二、焦没食子酸法
焦没食子酸法利用的是化学反应来营造厌氧环境。它与碱反应时，会消耗氧气，从而在相对密闭的空间内形成厌氧环境。
优点：成本较低，操作也相对简单，不需要复杂的设备，在早期的厌氧菌培养研究中应用较为广泛。
缺点：
1. 反应过程中可能会产生的NO等杂质，不利于一些细菌生长；
2. 在吸收氧气的同时，它也会吸收二氧化碳，而二氧化碳对于某些厌氧菌的生长是必需的，这就可能导致某些厌氧菌无法良好生长；
3. 对反应的温度、湿度等实验条件的控制要求较高，若条件控制不当，会影响除氧效果；
4. 指示剂不够灵敏，难以准确判断厌氧环境是否达到要求。
三、厌氧产气袋法
（三菱瓦斯化学株式会社AnaeroPack系列）
厌氧产气袋法的原理是将产气袋与平板一同放入密封空间，产气袋中的化学成分遇水反应生成氢气和二氧化碳，钯催化剂促使氢气与残余氧气结合生成水，将罐内氧浓度降至1%以下，营造无氧环境供厌氧菌生长。
优点：
1. 操作简便，无需复杂设备，仅需“产气袋 + 灵活密封空间" 的简易搭配；
2. 快速除氧：通常30-60分钟内氧气就能被吸收，有利于厌氧菌快速进入生长状态。
缺点：
1. 产气袋属于一次性消耗品，单次使用成本较高，对于大规模的厌氧培养需求，用量较大，成本会显著增加；
2. 密封要求高，厌氧罐盖若未拧紧或密封圈老化，易漏氧导致培养失败；
3. 无法实时调节气体成分，若厌氧菌对二氧化碳浓度有特殊要求，难以精准适配。
四、厌氧手套箱法
厌氧手套箱法是通过向密封箱体内充入混合气体，并利用钯催化剂持续催化氢气与氧气反应生成水，从而主动、持续地维持箱内稳定的无氧环境。主要通过以下三个部分协同工作：
1.循环除氧系统（核心）
系统向箱内通入混合气体（含N₂、H₂、CO₂按比例组成）。H₂与箱内气体中残留的O₂，在钯催化剂的表面反应生成H2O，从而消耗掉氧气。
这个循环除氧的过程会持续进行，确保任何通过传递舱或手套操作缝隙微量渗入的氧气被立刻清除。
2.气体置换舱（传递舱）
这是物品进出箱体的“气锁"。它是一个带有内外两道门的密封小舱室。
放入物品流程：
1. 打开外门，放入物品，关闭外门。
2. 启动“置换"程序，舱内会进行多次抽真空→充入混合气体的循环，以排除舱内所有的空气（氧气）。
3. 当舱内气体与箱体内气体一致后，才能打开内门，将物品移入主工作箱体。
3.密封箱体与手套接口
人员通过箱体上固定的密封手套进行操作，在隔绝外界空气的前提下，处理箱内的样品和实验。
优点：
1. 能提供非常稳定的厌氧条件，氧气浓度可降到极低水平；
2. 可在箱内进行多种实验操作，兼顾固液培养形式，适合大规模培养厌氧菌的研究；
3. 无需频繁打开箱门，有效避免外界空气的干扰和污染；
4. 部分手套箱内置培养箱/温控系统，可进行精确温度控制，方便进行长时间培养和实时观察。
缺点：
1.设备价格昂贵，维护和保养也需较高的费用；
2. 设备长期运行，气体消耗量大，运行成本高；
3. 占用空间大，需要专门的场地放置
4. 操作步骤复杂，需要随时随地观察设备运行情况，否则易出现操作失误，影响实验结果。
五、抽气换气厌氧培养法
抽气换气厌氧培养法是通过人工操作真空泵抽取密闭容器内空气，再手动注入氮气、二氧化碳等无氧混合气体，重复2-3次抽换流程排尽氧气，最终形成厌氧环境。
优点：
1. 气体置换效率高，能快速将氧浓度降至较低水平；
2. 可调控气体成分比例，适配不同厌氧菌需求；
3. 无化学试剂反应产物，避免对菌株生长产生额外抑制。
缺点：
1. 需单独配备真空泵、高压气体钢瓶、减压阀等成套设备，初期投入成本高，占用实验空间；
2. 全程依赖人工操作，抽气/注气的压力、时间全凭经验把控，气体比例精准度差，易因操作差异导致培养结果波动；
3. 缺乏实时监控功能，无法直观判断罐内氧浓度、气体比例是否达标，需额外通过生物指示剂验证，耗时且繁琐。
传统厌氧菌培养中普遍存在的“操作繁琐“、"气体消耗大“、“环境难控"等核心痛点，正是华端生物HD-AN系列智能厌氧/微需氧培养系统旨在破解的关键。该系统以传统抽气换气法的气体抽排置换原理换为基础，优化了操作流程与控制精度，能够针对性解决这些长期困扰实验室的难题。
（2）华端生物HD-AN系列智能厌氧/微需氧培养系统的“超能力"
HD-AN系列 智能厌氧/微需氧培养系统
一、操作简单，一键厌氧
HD-AN系列智能厌氧微需氧系统搭载高精度传感器与自动控氧系统，可根据不同菌种需求，预设厌氧、微需氧、弯曲菌等多种核心培养模式。
一键生成，无需人工干预；
快速生成培养环境，大幅缩短等待时间：
最快达到微需氧条件＜70秒
最快达到厌氧环境＜150秒
二、成本低廉，多重适配
1. 设备随开随用，无其他耗材；
2. 气体消耗量极低：
达到厌氧环境气体消耗≤7L/12平皿
达到微需氧环境气体消耗≤2L/12平皿
3. 有丰富的培养罐选择，实现对各类培养载体的全面适配——提供8种培养罐可选：
适合放置 6 个、12 个、24 个、36 个、60个常规培养皿的型号
弯曲菌专用双孔培养皿的适配罐
可放置酶标板、96 孔板等微生物鉴定专用载体的培养罐
可放置 10 只培养袋的志贺氏菌专用培养罐
4. 配备注射针模式，是针对小型密封容器（如试管、西林瓶、增菌管等）设计的专属厌氧环境生成功能，专门解决传统方法处理小容量样本时 “密封难、除氧差、操作繁"的痛点。
三、实时监控，过程保障
系统配置无线氧浓度实时监测系统，用于厌氧和微氧微生物、细胞等培养时的氧浓度、二氧化碳浓度、温度、湿度等的实时监测，确保培养环境符合实验要求。
超出浓度范围机器自动报警提醒，帮助实验人员及时察觉设备状态变化，避免因操作失误或故障未及时处理导致的培养风险，使整个培养过程全程得到保障。
HD-AO系列 无线氧浓度实时监测系统
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