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抑菌圈测量原理分析介绍

更新时间:2023-07-07      点击次数:2774
  一、抑菌圈法又叫扩散法,是利用待测药物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制而形成透明圈,即抑菌圈,根据抑菌圈大小判定待测药物抑菌效价的一种方法。抑菌圈法操作便捷、简单易行、成本低廉、结果准确可靠,是抑菌试验的经典方法,被广泛使用。常用于抗生素产生菌的分离筛选。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被检菌能分泌某些抑制工具菌生长的物质,如抗生素等,便会在该菌落周围形成工具菌不能生长的抑菌圈,很容易被鉴别出来。
 
  二、主要有K-B法(Kirby-Bauertest)、牛津杯法和打孔法三种。K-B法即滤纸片法,选用质地均匀的滤纸,用打孔机打成直径相同的圆片,灭菌后烘干,浸泡于待测样品中,然后置于试验平板中培养一段时间后测定抑菌圈大小的一种方法。牛津杯法又称杯碟法,将已灭菌的牛津杯置于试验平板中,往杯中注入一定量的待测样品,培养一段时间后测定抑菌圈大小的一种方法。打孔法,是指用已灭菌的打孔器或钢管在试验平板上打孔,往孔中注入一定量的待测样品,培养一段时间后测定抑菌圈大小的一种方法。
 
  三、菌种的活化及菌液的制备:将冷冻保存的菌种划线接种至平板培养基,37℃培养24h;挑单菌落接种至100mL液体培养基,37℃、200r/min摇床培养过夜,菌液备用。倾注平板法:先往已灭菌的平板中接种1mL菌液,然后倾注约20mL已冷却至50℃左右的平板培养基,混合均匀,水平静置凝固后备用。预加菌液倾注平板法:往已冷却至50℃左右的平板培养基中注入一定量的菌液,混合均匀,倾注平板(约20mL/平板),水平静置凝固后备用。
 
  四、结果表明:打孔法操作简单、方便快捷,获得的抑菌圈质量高、重复性好,是优先选用的方法。
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